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面议概述
* 9%的细胞转染效率 * 无明显毒性 * 通过siRNA表达的基因敲除 * 体内外应用非病毒转染
应用
用于体内外RNAi基因敲除的siRNA转染
右上:使用Neuro9 siRNA处理富集(>90%)E18大鼠初级皮层神经元DIV12以对抗HPRT表达。治疗后48h用qPCR检测HPRT mRNA。*** P < 0.001
中间:使用Neuro9 siRNA处理富集(>90%)E18大鼠初级皮层神经元DIV12以对抗HPRT表达48h后。细胞毒性用PrestoBlue检测。
右下:在不同成熟阶段使用Neuro9 siRNA对抗PTEN对大鼠初级神经元进行处理。
Neuro9耐受性良好,可应用于DIV≥2 。这种灵活性为新的实验可能性打开了大门。*** P < 0.001
Neuro9在体外细胞培养和转染
siRNA: >95%细胞转染效率
荧光标记的Nruro9(红)用于观察MAPS+神经摄取(绿)
流式细胞术结果说明Neuro9的细胞摄取
Neuro9在体内细胞培养和转染
siRNA: >95%细胞转染效率
Neuro9(红)局部注射入大鼠体感皮质层。5天后移除脑部,切片并成像。Calcein-AM染料(绿)表明在成像时神经元是活的。用Luc siRNA处理后,与另半边脑的对照样品相比,来自注射部位1mm样品的Western blots结果显示了靶基因PTEN的敲除现象。